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细黄链霉菌SHMCCD59074-苜蓿疫霉SHMCCD64217-黒曲霉

试剂盒是一种2×预混液,专为多重qPCR设计,支持探针法进行高效的基因定量分析。

10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。

操作简单:无需脱色或冲洗,可直接使用紫外凝胶透射仪观察。

在分子生物学领域,DNA聚合酶是PCR技术的核心工具,而Pfu DNA Polymerase因其卓越的高保真性脱颖而出,成为精准基因扩增的首选酶。 Pfu DNA Polymerase是从嗜热菌Pyrococcus furiosus中分离纯化而来的一种耐热DNA聚合酶。与常见的Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶最大的优势在于其具有强大的3'到5'外切酶活性,这种活性赋予了Pfu酶校正功能,使其在DNA合成过程中能够及时纠正错误配对的碱基,从而显著提高DNA扩增的准确性。研究表明,Pfu酶的保真度是Taq酶的约7倍,这意味着在扩增长片段DNA或需要高准确性的基因克隆实验中,Pfu酶能够更有效地避免突变的产生。 Pfu DNA Polymerase的耐热性也使其能够适应PCR反应中的高温变性步骤,保证在每个循环中都能稳定地合成DNA。这种耐热性与高保真性相结合,使得Pfu酶在长片段DNA扩增中表现出色。由于其校正功能减少了错误碱基的累积,Pfu酶能够更有效地合成较长的DNA片段,而不会因突变导致扩增失败。

二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。

DNA Marker I Plus是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由7条线状双链DNA条带组成,覆盖100 bp到700 bp的范围,条带大小分别为100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp和700 bp。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,无需额外处理。清晰的电泳条带:条带浓度均匀,其中400 bp条带为加亮带,便于观察。适用范围:适用于100 bp到700 bp的DNA片段分析,不建议用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。使用方法上样量:根据电泳梳子的厚度和宽度确定上样量。一般情况下,每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;窄齿梳子(1 mm × 2 mm)上样2 µL;宽齿梳子(1 mm × 5 mm)上样5 µL。电泳条件:建议使用2.0%-2.5%的琼脂糖凝胶,电泳电压4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。染色与观察:电泳结束后,使用EB或Goldview等染料染色,然后在紫外灯下观察条带。

90% 甲酰胺(Formamide):用于变性核酸,使其保持单链状态。

Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯

One Step RT-qPCR Probe Kit适用于多种来源的RNA模板,包括病原微生物

在分子生物学研究和临床检测中,快速、准确地检测RNA序列是许多实验的关键。One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)凭借其独特的优势,成为实现这一目标的理想选择。 该试剂盒采用一步法RT-qPCR技术,将逆转录和定量PCR反应集成在同一管中完成。这种设计不仅简化了操作流程,减少了移液步骤,还有效降低了样本间交叉污染的风险。同时,试剂盒中加入了UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能够降解含有尿嘧啶的PCR产物,从而有效防止因残留产物导致的假阳性结果。 One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)还具备高灵敏度和高特异性的特点。它采用了优化的反应体系,能够高效合成cDNA,并在后续的qPCR中实现精准定量。即使对于低丰度的RNA模板,该试剂盒也能准确识别,特别适合检测微量RNA。此外,其热启动Taq DNA聚合酶和优化的反应条件,进一步提高了扩增效率和特异性。 在实际应用中,One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)广泛适用于检测总RNA、mRNA、RNA病毒等样本。

6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。

在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。

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