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嗜根寡养单胞菌Stenotrophomonas rhizophila-轴向海山盐单胞菌SHMCCD71977-异配囊接霉原变种

二甲苯青迁移速度较慢,适用于较大片段的示踪;溴酚蓝迁移速度较快,适用于较小片段的示踪。

在分子生物学研究和临床检测中,多重实时荧光定量PCR(qPCR)技术因其能够同时检测多个靶标而备受关注。然而,多重qPCR实验的成功依赖于高特异性、高灵敏度以及可靠的防污染体系。Multiplex Probe qPCR Mix (2X, UDG Plus)凭借其卓越的性能,成为实现这一目标的理想选择。 该试剂盒是一种2×预混液,专为多重qPCR设计,支持探针法进行高效的基因定量分析。它含有化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)。UDG通过降解含有尿嘧啶的DNA,有效防止了PCR产物的气溶胶污染,从而避免假阳性结果的出现。 此外,该试剂盒还采用了dUTP替代dTTP的技术,进一步提高了反应的特异性,减少了非特异性扩增的可能性。其优化的反应体系能够支持多达四重的qPCR反应,大大提高了实验效率。 Multiplex Probe qPCR Mix (2X, UDG Plus)不仅操作简便,还具有广泛的适用性。它适用于多种qPCR仪器平台,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Eppendorf等品牌。

其中,750 bp条带的浓度最高,约为20 ng/μL,其余条带浓度约为10 ng/μL。

在生命科学领域,Taq DNA Polymerase犹如一颗璀璨的明珠,闪耀着独特的光芒。它是一种耐热的DNA聚合酶,最初是从一种嗜热细菌——栖热水生菌(Thermus aquaticus)中分离出来的。这种细菌生活在高温的温泉环境中,而Taq酶也因此具备了在高温下稳定工作的能力,这使得它在分子生物学实验中扮演了不可或缺的角色。 Taq DNA Polymerase的主要功能是催化DNA的合成。在聚合酶链式反应(PCR)中,Taq酶的作用尤为关键。PCR是一种用于快速扩增特定DNA片段的技术,它通过反复的变性、退火和延伸三个步骤来实现DNA的指数级扩增。在变性阶段,DNA双链被高温分离成单链;退火阶段,引物与模板DNA结合;而在延伸阶段,Taq酶便大显身手。它能够以单链DNA为模板,从引物的3'端开始,按照碱基互补配对原则,将一个个脱氧核苷酸添加到新链上,从而合成与模板互补的DNA链。由于Taq酶在高温下仍能保持活性,这使得PCR反应可以在较高的温度下进行,大大提高了反应的特异性和效率。

试剂盒整合了dUTP/UDG防污染系统,通过在PCR扩增产物中掺入 dUTP,有效避免了假阳性结果

GoldenView 吖啶橙核酸染料是一种新型的核酸染料,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于检测DNA和RNA。它是一种安全、高效的替代品,可替代传统的溴化乙锭(EB)染料。 产品特性 GoldenView 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当。在紫外透射光下,双链DNA(dsDNA)呈现绿色荧光,而单链DNA(ssDNA)或RNA则呈现红色荧光。这种特性使其能够清晰地区分DNA和RNA,适用于多种核酸分析实验。 使用方法 使用GoldenView进行琼脂糖凝胶电泳时,操作方法与EB完全相同。通常在100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µl的GoldenView,轻轻摇匀后倒胶,待凝胶完全凝固后进行电泳。电泳完成后,可在紫外灯下直接观察核酸条带。 安全性 GoldenView的主要成分是吖啶橙,虽然具有细胞渗透性,但通过多项致突变性试验验证,结果均为阴性。然而,为确保安全,建议操作时佩戴手套和口罩,避免接触皮肤。

样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。

DL2000 DNA Marker是一种广泛应用于琼脂糖凝胶电泳的DNA分子量标准,由特定长度的双链DNA片段组成,可用于估算DNA片段的大小。产品特性DL2000 DNA Marker通常包含6条双链线状DNA条带,分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp和2000 bp。其中,750 bp条带的浓度通常较高(约100 ng/5 µL),便于观察和作为参考。该Marker已预混有1×Loading Buffer,可直接用于电泳,使用方便。使用方法 电泳条件:建议在1.0% - 2.0%的琼脂糖凝胶中使用,电泳缓冲液可选用1×TAE或0.5 - 1×TBE。电压一般控制在5 - 10 V/cm,电泳时间根据凝胶浓度和电压调整。 上样量:通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。 染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,然后在紫外灯下观察电泳条带。保存条件短期保存:4℃可保存6个月。长期保存:-20℃可保存1 - 2年。避免反复冻融:反复冻融可能导致条带降解,影响电泳效果。

4S Green Plus 无毒核酸染料作为一种新型的EB替代品,为科研人员提供了一种安全。

在分子生物学实验中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的重要挑战。Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)凭借其卓越的长片段扩增能力和预混染料的便捷性,成为了这一领域的理想选择。 Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系,其核心成分为Ultra-Long DNA Polymerase。这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。 与无染料版本不同,Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料。这种设计使得实验人员在完成PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。

其高灵敏度和稳定性使其能够检测低丰度的靶标,即使在样本量有限的情况下也能提供可靠的定量结果。

Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于DNA和RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由450 mM Tris-硼酸和10 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释5倍后得到的0.5×TBE工作液含有45 mM Tris-硼酸和1 mM EDTA,pH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将5×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释5倍,制备0.5×工作液。电泳操作:将稀释后的0.5×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。

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