将 4S Green 加入冷却至 50-60℃的琼脂糖溶液中，使其终浓度为 1×，轻轻混合后倒胶。

T7 Endonuclease I（T7EI）是一种来源于T7噬菌体的核酸内切酶，能够特异性识别并切割DNA中的错配碱基对、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。这种酶在基因编辑领域，尤其是CRISPR-Cas9技术中，被广泛用于检测基因突变和编辑效率。 功能与特性 错配识别：T7EI能够识别DNA中的不完全配对碱基对，并在错配位点的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。 高特异性：该酶对特定DNA结构具有高度特异性，能够有效区分野生型和突变型DNA。 应用广泛：除了用于基因编辑效果的检测，T7EI还可用于分解四方向交叉DNA、检测或切割异源双链DNA、随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。 在CRISPR基因编辑中的应用 在CRISPR-Cas9基因编辑中，T7EI常用于检测目标基因是否成功引入突变。具体步骤如下： PCR扩增：分别以野生型和突变型DNA为模板，扩增包含突变位点的DNA片段。 变性与退火：将PCR产物变性后退火，形成异源双链DNA。 酶切反应：加入T7EI，在37℃下反应15-30分钟，通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。

使用10×DNA Loading Buffer时，通常按照1:9（上样缓冲液：DNA样品）的比例混合

在分子生物学和生物医学研究中，荧光定量PCR（qPCR）是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG）技术，为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案，特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应，将RNA转录为cDNA，然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果，但操作步骤繁琐，容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计，将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中，大大简化了操作流程，减少了人为误差，提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶（U）的DNA，从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前，UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶，防止非特异性扩增。

One Step RT-qPCR Probe Kit适用于多种来源的RNA模板，包括病原微生物

T4 DNA聚合酶是一种来源于T4噬菌体的酶，具有独特的酶活性和广泛的应用价值。它能够催化DNA的5'→3'方向合成，同时具备3'→5'核酸外切酶活性，但不具有5'→3'核酸外切酶活性。这种酶在分子生物学实验中被广泛应用于多种场景。 工作原理 T4 DNA聚合酶的活性依赖于模板和引物的存在。它通过识别单链DNA模板上的引物，从5'端向3'端合成新的DNA链。此外，它还具有3'→5'外切酶活性，能够在没有dNTPs的情况下，按3'→5'方向降解双链DNA。这种外切酶活性在存在特定dNTP时会被抑制，例如当反应体系中仅存在dGTP时，酶会在遇到G碱基时停止降解。 应用 T4 DNA聚合酶在分子克隆中具有重要应用。例如，在In-Fusion克隆技术中，它利用3'→5'外切酶活性生成单链5'突出端，通过互补序列的退火实现DNA片段的无缝连接。此外，它还被用于DNA末端修饰，如将黏性末端转换为平末端，或在3'末端添加特定核苷酸。 在高通量测序（NGS）中，T4 DNA聚合酶用于文库构建，通过平滑DNA末端或添加特定序列，提高测序效率。它还被用于位点特异性突变、DNA末端标记等应用。

DL2000 Plus在正常使用条件下，可在室温下稳定存放，不会出现条带降解或弥散现象

Bst Plus DNA Polymerase 是一种来源于嗜热土芽孢杆菌（Thermophilic Geobacillus sp.）的DNA聚合酶，经过基因工程改造去除了5′→3′核酸外切酶活性。该酶具有强大的5′→3′ DNA聚合酶活性、链置换活性以及对dUTP的耐受性，非常适合用于防污染的等温扩增反应。 产品特性 高灵敏度：在LAMP等温扩增反应中，灵敏度低至50 copies/T，反应时间小于15分钟。 高扩增效率：能够在65℃的等温条件下高效扩增DNA，反应时间通常为30-60分钟。 dUTP耐受性：具有较高的dUTP耐受性，适合防污染的等温扩增反应。 热稳定性：最佳反应温度为65℃，可在50-68℃的温度范围内稳定工作。 应用场景 Bst Plus DNA Polymerase 广泛应用于以下领域： 环介导等温扩增（LAMP）：用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。 链置换扩增（SDA）：用于高灵敏度的核酸扩增。 滚环扩增（RCA）：用于DNA的高效率扩增。 全基因组扩增（WGA）：用于微量DNA模板的快速扩增。 使用方法 储存条件：-20℃保存，避免反复冻融。

它能够催化DNA链的5'-磷酸和3'-羟基末端形成磷酸二酯键，从而连接相邻的DNA片段。

10 mg/ml的溴化乙锭（Ethidium Bromide，EB）溶液是一种常用的核酸染料，广泛应用于分子生物学实验中，尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子，能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA（dsDNA）结合时，荧光强度会增强约25倍，与双链RNA（dsRNA）结合时，荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下（如10 µg/ml）染色后无需脱色处理，即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时，通常有两种染色方法： 电泳前染色：在制胶时加入EB，使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如，每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液，混匀后倒胶。 电泳后染色：将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中，染色15-45分钟。 需要注意的是，EB具有较强的诱变性和毒性，操作时应佩戴手套和实验服，避免直接接触皮肤。此外，EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃，以避免环境污染。

这种特性使得EB在低浓度下（如10 µg/ml）染色后无需脱色处理，即可在紫外光下清晰观察到核酸条带

在现代分子生物学实验室中，Taq PCR Master Mix（2×）是一种极为重要的实验试剂，它为聚合酶链式反应（PCR）的高效进行提供了强大的支持。这种预混液以其便捷性和高效性，成为了众多科研人员和实验工作者的首选。 Taq PCR Master Mix（2×）是一种预先配制好的PCR反应体系，其浓度为常规反应所需浓度的两倍。它包含了Taq DNA聚合酶、dNTPs（脱氧核苷三磷酸）、反应缓冲液以及其他必要的成分，但不包含染料。这种设计使得实验人员在进行PCR反应时，只需将模板DNA、引物和水加入到预混液中，即可快速配制好反应体系，大大简化了实验操作步骤，节省了时间和精力。 Taq PCR Master Mix（2×）的高效性主要体现在以下几个方面。首先，它所含的Taq DNA聚合酶具有出色的耐热性和高效的DNA合成能力，能够在短时间内完成目标DNA片段的扩增。其次，预混液中的反应缓冲液经过优化，能够为Taq酶提供最佳的反应环境，确保反应的高效进行。此外，dNTPs的浓度也经过精确调整，能够满足PCR反应的需求，同时避免因过量而导致的副反应。

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