将 4S Green 10000× 储液稀释至 3× 染色液,将凝胶浸泡其中,室温振荡染色 30 分
在分子生物学研究和临床检测中,多重实时荧光定量PCR(qPCR)技术因其能够同时检测多个靶标而备受关注。然而,多重qPCR实验的成功依赖于高特异性、高灵敏度以及可靠的防污染体系。Multiplex Probe qPCR Mix (2X, UDG Plus)凭借其卓越的性能,成为实现这一目标的理想选择。 该试剂盒是一种2×预混液,专为多重qPCR设计,支持探针法进行高效的基因定量分析。它含有化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)。UDG通过降解含有尿嘧啶的DNA,有效防止了PCR产物的气溶胶污染,从而避免假阳性结果的出现。 此外,该试剂盒还采用了dUTP替代dTTP的技术,进一步提高了反应的特异性,减少了非特异性扩增的可能性。其优化的反应体系能够支持多达四重的qPCR反应,大大提高了实验效率。 Multiplex Probe qPCR Mix (2X, UDG Plus)不仅操作简便,还具有广泛的适用性。它适用于多种qPCR仪器平台,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Eppendorf等品牌。
它具有与 EB 相当的灵敏度,能够检测到低浓度的核酸分子,同时避免了 EB 的高毒性和潜在致癌性。
在分子生物学的研究中,5'端DNA/RNA腺苷酰化酶(5'-Terminal DNA/RNA Adenylyltransferase)是一种极为重要的酶,它能够对核酸的5'端进行腺苷酰化修饰,从而在核酸的结构和功能研究中发挥关键作用。这种酶的活性和特异性使其成为核酸修饰领域的“工程师”。 5'端腺苷酰化酶的功能 5'端腺苷酰化酶的主要功能是在DNA或RNA的5'末端添加一个腺苷酸(AMP)基团。这种修饰可以显著改变核酸的物理和化学性质,增强其稳定性和反应性。例如,在DNA研究中,腺苷酰化的DNA末端可以用于连接特定的接头序列或载体骨架,从而提高分子克隆的效率。在RNA研究中,腺苷酰化的RNA可以用于制备探针,用于基因芯片分析或原位杂交实验,帮助科学家快速定位和检测目标RNA。 在基因工程中的应用 在基因工程领域,5'端腺苷酰化酶的应用非常广泛。例如,在构建基因表达载体时,腺苷酰化的DNA末端可以与特定的接头序列或载体骨架高效连接,从而提高克隆效率。此外,腺苷酰化的DNA还可以用于制备探针,用于基因芯片分析或原位杂交实验,帮助科学家快速定位和检测目标基因。
研究表明,IL - 11 可以调节骨代谢,促进骨形成,抑制骨吸收,从而改善骨质疏松症状。
在人类细胞的复杂调控网络中,WISP-1(Wnt诱导分泌蛋白-1)是一种多功能的细胞因子,它在细胞增殖、分化、迁移和组织修复等多个生理过程中发挥着重要作用。WISP-1属于CCN蛋白家族,这一家族的成员在细胞外基质的形成和细胞间信号传导中扮演着关键角色。 多功能的细胞因子 WISP-1是一种分泌性蛋白,主要通过与细胞表面受体结合来调节细胞内的信号通路。它能够促进细胞的增殖和分化,特别是在成骨细胞和软骨细胞中。研究表明,WISP-1在骨骼和软骨的发育过程中起着关键作用,它通过激活Wnt/β-catenin信号通路,促进成骨细胞的成熟和骨组织的形成。 组织修复与再生 除了在发育过程中的作用,WISP-1还在组织修复和再生中发挥重要作用。在损伤部位,WISP-1能够促进细胞的迁移和增殖,加速伤口愈合。例如,在皮肤损伤后,WISP-1的表达水平显著升高,它通过调节细胞外基质的合成和重塑,促进皮肤的再生和修复。 癌症中的双重角色 WISP-1在癌症中的作用较为复杂,它既可以作为肿瘤抑制因子,也可以作为肿瘤促进因子。
在基因组测序领域,MNase能够快速切割DNA,生成适合测序的片段,提高测序效率。
T3 DNA连接酶是一种ATP依赖型的双链DNA连接酶,来源于T3噬菌体。它能够催化双链DNA中相邻的5'磷酸和3'羟基之间形成磷酸二酯键,广泛应用于分子克隆和基因工程。 工作原理 T3 DNA连接酶通过ATP提供能量,连接双链DNA的黏性末端和平末端。它对A/T突出末端的连接效率高于C/G末端,尤其在高盐环境下表现出色。在反应体系中加入PEG 6000可以显著提高其对平末端的连接效率。 特点 高盐耐受性:与T4 DNA连接酶相比,T3 DNA连接酶对NaCl的耐受性更高,能够在1.0 M NaCl或KCl的条件下保持95%的活性。 高效连接:对A/T突出末端的连接效率高于C/G末端。 反应条件:最佳反应温度为25℃,反应缓冲液中通常含有ATP、MgCl₂和PEG 6000。 应用 T3 DNA连接酶广泛应用于以下领域: 分子克隆:用于黏性末端和平末端DNA片段的连接。 定点突变:通过连接特定的DNA片段实现基因突变。 高盐体系连接:适用于需要高离子浓度的实验。 RNA连接:能够连接DNA和RNA杂合双链,用于生成DNA-RNA和RNA-DNA融合链接。
其中,UBE2B(泛素结合酶E2B)扮演着不可或缺的角色。
可溶性CD40配体(sCD40L)是CD40配体(CD40L)的一种可溶性形式,在人体免疫系统中发挥着重要的调节作用。CD40L主要由活化的T细胞、血小板和某些树突状细胞表达,通过与CD40结合,调节免疫细胞的活化、增殖和功能。 sCD40L的生物学功能 sCD40L通过与CD40结合,激活多种免疫细胞,包括B细胞、巨噬细胞和树突状细胞。它在免疫反应中具有多种生物学功能: B细胞活化:sCD40L能够促进B细胞的增殖、分化和抗体分泌,增强体液免疫反应。 巨噬细胞活化:sCD40L能够刺激巨噬细胞的吞噬和杀菌能力,增强细胞介导的免疫反应。 树突状细胞成熟:sCD40L能够促进树突状细胞的成熟和抗原呈递能力,调节T细胞的活化。 sCD40L与疾病 sCD40L在多种疾病中表现出异常的表达水平。例如,在某些自身免疫性疾病中,如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮,sCD40L的水平显著升高,可能导致免疫反应失控,加重炎症反应。在心血管疾病中,sCD40L的升高与动脉粥样硬化和血栓形成相关。此外,sCD40L在某些癌症中也表现出异常的表达,可能影响肿瘤免疫微环境。
EDTA:60 mM,用于螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。
在生物医学研究中,白细胞介素-1β(IL-1β)是一种关键的促炎细胞因子,广泛参与免疫反应和炎症过程。小鼠作为一种重要的实验动物模型,其免疫系统与人类高度相似,能够模拟多种人类疾病。因此,小鼠IL-1β的研究对于理解人类炎症和免疫反应具有重要意义。 IL-1β的生物学功能 IL-1β主要由巨噬细胞、树突状细胞和内皮细胞等产生,是炎症反应的主要启动因子之一。它通过与细胞表面的IL-1受体结合,激活多种信号通路,如NF-κB和MAPK通路,从而诱导多种炎症相关基因的表达。这些基因编码的蛋白能够促进炎症细胞的招募、激活和增殖,增强炎症反应。此外,IL-1β还能刺激其他细胞因子的释放,进一步放大炎症信号。 小鼠模型中的应用 小鼠模型在免疫学研究中具有重要价值,其免疫系统与人类高度相似,能够模拟多种人类疾病。在小鼠模型中,IL-1β的研究为理解人类免疫反应提供了重要线索: 炎症研究:通过在小鼠模型中注射重组IL-1β,可以诱导炎症反应,研究炎症的发病机制和进展。这种模型常用于研究类风湿性关节炎、炎症性肠病等炎症性疾病。
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