将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液
3×甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专门用于核酸电泳的辅助试剂,特别适用于RNA样品的变性电泳。它能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分该缓冲液的主要成分包括: 90% 甲酰胺(Formamide):用于变性核酸,使其保持单链状态。0.075% 二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 0.075% 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。30 mM EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。变性处理:将混合后的样品在 70℃加热变性 5-15 分钟,然后立即置于冰上冷却,以防止核酸复性。电泳上样:将处理后的样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景3×甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于RNA样品的变性电泳,适用于甲醛变性或非变性的琼脂糖凝胶电泳以及聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可用于寡聚单链DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。储存条件该缓冲液应冷藏保存(2-8℃),以确保其稳定性和有
对于小于500 bp的DNA片段,检测信号可能较弱,建议使用其他染料如SYBR Green I。
TAFE凝胶电泳缓冲液(10×)是一种专为核酸电泳设计的高浓度缓冲液,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳实验中。它主要由Tris、乙酸和EDTA组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由200 mM Tris-乙酸和5 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TAFE工作液含有20 mM Tris-乙酸和0.5 mM EDTA,pH值约为8.2。高效分离:适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。缓冲能力强:在长时间电泳中,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TAFE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TAFE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。
对肠道病毒RNA进行4倍稀释系列检测,结果显示One Step RT-qPCR能够以更高的灵敏度检测
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的高浓度缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性成分:主要由2M Tris-acetate、50 mM EDTA和DEPC处理水组成。工作液浓度:稀释50倍后的1×TAE工作液含有40 mM Tris-acetate和1 mM EDTA,pH值约为8.0。 无RNase污染:经过DEPC处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将50×TAE缓冲液用DEPC处理水稀释50倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TAE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察RNA条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,开封后建议尽快使用。避免RNase污染:使用时需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。
Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)广泛应用于基因克隆、基因表达分析
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确的荧光信号检测是实验成功的关键。50× ROX Reference Dye作为一种常用的被动参考染料,为qPCR实验提供了重要的校准功能,确保了荧光信号的准确性和稳定性。 ROX Reference Dye的作用机制 ROX染料是一种被动参考荧光染料,其主要作用是校正qPCR反应中的非特异性荧光背景和孔间荧光信号的差异。在qPCR实验中,荧光信号的强度可能会受到多种因素的影响,如仪器的荧光检测系统的波动、反应体系的差异以及孔间位置的差异等。ROX染料通过提供一个稳定的荧光背景,帮助校正这些非特异性信号,从而提高定量结果的准确性和重复性。 50× ROX Reference Dye的应用 荧光定量PCR(qPCR):在qPCR实验中,ROX染料通常以一定比例添加到反应体系中。它不会参与PCR反应,但会提供一个稳定的荧光背景,用于校正仪器检测到的荧光信号。通过校正,可以更准确地反映目标基因的扩增情况,从而提高定量结果的可靠性。 多重qPCR:在多重qPCR实验中,ROX染料的作用尤为重要。
4S GelBlue 核酸染料是一种高灵敏度、低毒性、稳定的荧光核酸染色试剂。
全能核酸酶(Benzonase Nuclease)是一种源自粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的重组核酸内切酶,经过基因工程改造,能够高效降解所有形式的DNA和RNA,包括单链、双链、线状、环状和超螺旋结构。这种酶因其广泛的核酸降解能力和高效性,被广泛应用于生物制药和基础科研领域。 特性与优势 广谱降解能力:无差别切割所有形式的DNA和RNA,将其降解为2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸。 高活性与稳定性:在多种条件下(如高盐、高尿素、SDS等)仍保持高效活性。 无蛋白酶活性:不具有蛋白水解活性,不会对蛋白质样品造成损伤。 高纯度:通过基因工程在大肠杆菌中表达纯化,纯度超过99%,无内毒素污染。 应用场景 去除核酸污染:在蛋白纯化过程中,全能核酸酶可有效去除核酸污染,降低溶液粘度,提高蛋白提取效率。 细胞裂解液处理:在细胞裂解后,全能核酸酶能够降解释放的核酸,减少溶液粘度,便于后续操作。 疫苗和病毒样品制备:用于去除疫苗和病毒样品中的DNA污染,确保生物制品的安全性和功效。
试剂盒整合了dUTP/UDG防污染系统,通过在PCR扩增产物中掺入 dUTP,有效避免了假阳性结果
SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。其10000×浓缩液形式为实验操作提供了极大的便利,能够显著提高核酸检测的效率和灵敏度。产品特性SYBR Green I与双链DNA(dsDNA)结合后,荧光强度可增强1000倍,其检测灵敏度是传统溴化乙锭(EB)的25-100倍。这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。应用范围SYBR Green I适用于多种核酸分析方法,包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳。此外,它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。使用方法 SYBR Green I可以采用预染或后染的方法进行核酸染色。预染时,将10000×的SYBR Green I稀释100倍,加入样品中室温孵育10分钟后再进行电泳。后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。在qPCR中,SYBR Green I通常以0.2×到1×的终浓度加入反应体系中。
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