Pfu酶能够在95°C的高温下保持活性,适用于PCR反应中的高温变性步骤,已成为分子生物学实验中工具
肿瘤坏死因子超家族成员——小鼠白细胞介素 - 6(OSM,Oncostatin M)是一种多功能细胞因子,在小鼠的免疫反应和组织修复中发挥着关键作用。OSM主要由活化的T细胞、巨噬细胞和某些内皮细胞产生,参与调节多种细胞的生长、分化和功能。 OSM的生物学功能 OSM通过与OSM受体(OSMR)和gp130受体复合物结合发挥作用。它在多种细胞类型中具有广泛的生物学功能。在免疫细胞中,OSM能够促进T细胞和B细胞的增殖和活化,增强免疫反应。此外,OSM还能够调节巨噬细胞的活性,促进其吞噬和杀菌能力,从而在抗感染免疫中发挥重要作用。 在非免疫细胞中,OSM也表现出显著的调控作用。它能够促进肝细胞和成纤维细胞的增殖,参与组织修复和再生。例如,在肝脏损伤时,OSM能够刺激肝细胞的增殖,加速肝脏的修复过程。此外,OSM还能够调节脂肪细胞的代谢,影响脂肪的储存和分解。 OSM与疾病 OSM在多种慢性炎症性疾病和自身免疫性疾病中表现出异常的高表达。例如,在类风湿性关节炎、银屑病和炎症性肠病中,OSM的水平往往显著升高。这表明OSM可能在这些疾病的发生和发展中发挥重要作用。
它可能参与调节血管内皮细胞的生长和存活,其异常表达可能与动脉粥样硬化等疾病的发生有关。
在细胞内复杂的蛋白质调控网络中,泛素化是一种关键的蛋白质修饰过程,它在蛋白质降解、细胞周期调控、信号转导等生物学过程中发挥着重要作用。泛素结合酶E2L3(Ubiquitin Conjugating Enzyme E2L3,UBE2L3)作为泛素化途径中的核心成员之一,承担着将泛素从激活酶E1传递到泛素连接酶E3的重要任务,是泛素化反应的“精准调控者”。 泛素结合酶E2L3的特性 泛素结合酶E2L3(UBE2L3)是一种高度特异性的酶,能够特异性地识别并结合由E1激活的泛素。在泛素化反应的第二步中,UBE2L3通过其活性位点的半胱氨酸残基与泛素形成共价键,从而将泛素从E1转移到自身。这一过程为后续的泛素连接酶E3介导的泛素转移提供了必要的中间体。UBE2L3在多种细胞类型中广泛表达,并在多种生物学过程中发挥重要作用,特别是在免疫应答和细胞周期调控中。 广泛的应用 UBE2L3在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在体外泛素化实验中,UBE2L3被用于研究泛素化过程中的关键步骤,帮助科学家们理解泛素从E1到E3的传递机制。
白细胞介素 - 8(IL - 8)是一种重要的趋化因子,主要在炎症反应中发挥关键作用。
Taq DNA连接酶是一种来源于嗜热菌(Thermus aquaticus)的耐高温DNA连接酶,能够催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5'-磷酸和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。这种连接反应仅在两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对且无间隙的条件下才会发生。 工作原理 Taq DNA连接酶以NAD⁺作为辅因子,在37℃至75℃的高温条件下表现出高效的连接活性。它特别适合用于连接具有较长黏性末端的DNA片段,例如12碱基对的突出末端,但对4碱基末端的连接效率较低。 特点 耐高温:在高温(37℃至75℃)条件下具有高活性,适合高温反应。 高特异性:连接反应仅在寡核苷酸链与靶DNA完全配对时发生,可用于检测单碱基替换。 高保真性:经过改造的高保真Taq DNA连接酶(HiFi Taq DNA Ligase)进一步降低了错配连接率,提高了诊断的准确性。 应用 Taq DNA连接酶广泛应用于以下领域: 分子诊断:用于连接酶检测反应(LDR)和多重连接依赖式探针扩增(MLPA),检测基因组中的单核苷酸多态性(SNP)和拷贝数变异(CNV)。
IL-8(77aa)还能激活中性粒细胞,促进其脱颗粒和释放炎症介质,进一步放大炎症反应。
Eotaxin(嗜酸性粒细胞趋化因子),也称为CCL11,是一种重要的趋化因子,属于CC趋化因子家族。它在免疫系统中发挥着关键作用,主要通过调节嗜酸性粒细胞的迁移和激活来维持免疫平衡。Eotaxin广泛存在于多种细胞和组织中,包括巨噬细胞、单核细胞、内皮细胞和成纤维细胞等。 Eotaxin的结构与功能 Eotaxin是一种小分子蛋白,由74个氨基酸组成,分子量约为8.5kDa。它通过与特定的G蛋白偶联受体结合,发挥其生物学功能。Eotaxin的主要受体是CCR3,该受体广泛表达在嗜酸性粒细胞、单核细胞和某些T细胞亚群上。 在免疫细胞迁移中的作用 Eotaxin在嗜酸性粒细胞的迁移中起着重要作用。它能够吸引嗜酸性粒细胞向炎症部位迁移,从而增强免疫反应。例如,在过敏反应和寄生虫感染中,Eotaxin的释放能够引导嗜酸性粒细胞迅速到达受损组织,发挥免疫监视和清除功能。 在炎症反应中的作用 Eotaxin不仅促进嗜酸性粒细胞的迁移,还参与调节炎症反应。它能够增强嗜酸性粒细胞的活化和脱颗粒,释放炎症介质,如组胺和细胞毒性蛋白。
此外,它还被用于DNA末端修饰,如将黏性末端转换为平末端,或在3'末端添加特定核苷酸。
在分子生物学和生物技术领域,T4 DNA聚合酶是一种极为重要的工具酶,以其高效性和多功能性在DNA合成、修复和克隆等实验中发挥着关键作用。这种酶来源于T4噬菌体,广泛应用于各种DNA操作中,为科学家们提供了强大的支持。 T4 DNA聚合酶的特性 T4 DNA聚合酶是一种多功能酶,具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性。5'→3'聚合酶活性使其能够以单链DNA为模板,合成互补的DNA链,从而实现DNA的修复和合成。3'→5'外切酶活性则用于校正错误的核苷酸,确保DNA合成的准确性。这种酶的高效性和准确性使其在DNA操作中表现出色。 广泛的应用 T4 DNA聚合酶在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在DNA克隆实验中,它被用于填补DNA片段的凹端,制备平末端,从而提高DNA片段与载体的连接效率。在DNA测序中,T4 DNA聚合酶能够合成标记的DNA片段,用于后续的序列分析。此外,它还被用于DNA探针的合成,通过在DNA末端添加标记核苷酸,制备用于杂交实验的探针。
LoxP位点是一个34bp的DNA序列,包含两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区。
在分子生物学的微观世界中,核糖核酸酶III(dsRNA-specific,RNase III)以其对双链RNA(dsRNA)的高度特异性切割能力,成为基因表达调控和RNA代谢研究中不可或缺的“精准剪刀”。 RNase III是一种内切酶,专门识别并切割双链RNA分子。它在细胞中发挥着重要的生理功能,尤其是在基因沉默和RNA干扰(RNAi)过程中。RNAi是一种通过双链RNA诱导基因沉默的机制,广泛存在于真核生物中。RNase III在这一过程中扮演着关键角色,它能够将长的双链RNA切割成短的干扰RNA(siRNA),这些siRNA随后被整合到RNA诱导沉默复合体(RISC)中,进而特异性地降解与之互补的mRNA,从而实现基因沉默。 在大肠杆菌中,RNase III的活性对于维持细胞内RNA代谢的平衡至关重要。它能够降解由转座子和病毒产生的双链RNA,防止这些有害的RNA结构积累,从而保护细胞的基因组稳定性。此外,RNase III还参与了rRNA的加工和成熟过程,确保核糖体的正常组装和功能。 在实验室研究中,RNase III的特性被广泛利用。
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