电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
在分子生物学和生物技术领域,大肠杆菌DNA聚合酶I(E. coli DNA Polymerase I)是一种极为重要的工具酶,以其多功能性和高效性在DNA合成、修复和克隆等实验中发挥着关键作用。这种酶不仅在基础研究中不可或缺,还在生物技术应用中展现出广泛的潜力。 大肠杆菌DNA聚合酶I的特性 大肠杆菌DNA聚合酶I是一种多功能酶,具有三种主要活性:5'→3'聚合酶活性、3'→5'外切酶活性和5'→3'外切酶活性。5'→3'聚合酶活性使其能够以单链DNA为模板,合成互补的DNA链,从而实现DNA的修复和合成。3'→5'外切酶活性则用于校正错误的核苷酸,确保DNA合成的准确性。5'→3'外切酶活性则能够去除DNA末端的核苷酸,帮助修复DNA损伤和制备平末端。 广泛的应用 大肠杆菌DNA聚合酶I在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在DNA克隆实验中,它被用于平末端连接,通过填补DNA片段的凹端或去除末端的多余核苷酸,制备适合连接的平末端。在DNA测序中,DNA聚合酶I能够合成标记的DNA片段,用于后续的序列分析。
DL1000 Plus凭借其清晰的条带、高稳定性和便捷的操作,成为实验室中DNA电泳分析的理想选择
在分子生物学领域,DNA聚合酶是PCR技术的核心工具,而Pfu DNA Polymerase因其卓越的高保真性脱颖而出,成为精准基因扩增的首选酶。 Pfu DNA Polymerase是从嗜热菌Pyrococcus furiosus中分离纯化而来的一种耐热DNA聚合酶。与常见的Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶最大的优势在于其具有强大的3'到5'外切酶活性,这种活性赋予了Pfu酶校正功能,使其在DNA合成过程中能够及时纠正错误配对的碱基,从而显著提高DNA扩增的准确性。研究表明,Pfu酶的保真度是Taq酶的约7倍,这意味着在扩增长片段DNA或需要高准确性的基因克隆实验中,Pfu酶能够更有效地避免突变的产生。 Pfu DNA Polymerase的耐热性也使其能够适应PCR反应中的高温变性步骤,保证在每个循环中都能稳定地合成DNA。这种耐热性与高保真性相结合,使得Pfu酶在长片段DNA扩增中表现出色。由于其校正功能减少了错误碱基的累积,Pfu酶能够更有效地合成较长的DNA片段,而不会因突变导致扩增失败。
此外,在生物制药领域,耐热核糖核酸酶H也可以用于去除RNA杂质,确保药物的质量和安全性。
Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于DNA和RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由450 mM Tris-硼酸和10 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释5倍后得到的0.5×TBE工作液含有45 mM Tris-硼酸和1 mM EDTA,pH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将5×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释5倍,制备0.5×工作液。电泳操作:将稀释后的0.5×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。
它能够催化DNA链的5'-磷酸和3'-羟基末端形成磷酸二酯键,从而连接相邻的DNA片段。
CTP(胞苷三磷酸)是一种重要的核苷酸,广泛应用于分子生物学和生物化学实验中。100 mM CTP溶液(无核酸酶)是一种高纯度、无污染的试剂,适用于多种实验需求。 产品特点 高纯度:纯度≥99%,经过HPLC验证。 无核酸酶污染:经测试不含DNase、RNase、磷酸酶和蛋白酶,确保RNA和DNA的完整性。 稳定性高:在pH 7.3-7.5的条件下,CTP溶液极为稳定,可在-20℃保存长达2年。 用途广泛:适用于体外转录、RNA合成与扩增、siRNA合成等。 应用场景 体外转录:用于SP6、T3和T7 RNA聚合酶的反应,生成高质量的RNA。 RNA合成与扩增:提供能量支持,确保反应顺利进行。 siRNA合成:用于合成小干扰RNA,用于基因沉默。 使用注意事项 避免反复冻融:反复冻融会降低CTP的效率。 低温操作:使用时需在冰上操作,并在使用后立即放回-20℃保存。 防止污染:实验过程中需戴一次性手套,避免RNase污染。 100 mM CTP溶液(无核酸酶)凭借其高纯度、无污染和稳定性,已成为分子生物学实验中的重要试剂,特别适合需要高纯度和高效率的实验。
在基因组测序领域,MNase能够快速切割DNA,生成适合测序的片段,提高测序效率。
Trizol试剂是一种广泛应用于总RNA提取的试剂,因其高效裂解细胞和保护RNA完整性而备受科研人员青睐。其主要成分包括苯酚、异硫氰酸胍和β-巯基乙醇,这些成分协同作用,能够迅速破坏细胞结构,释放RNA,并有效抑制核酸酶的活性。 工作原理 Trizol试剂通过异硫氰酸胍和苯酚的协同作用,快速裂解细胞并释放核酸和蛋白质。在特定的pH条件下,RNA、DNA和蛋白质会根据其溶解度差异分层:RNA存在于水相中,DNA位于中间层,蛋白质则沉淀在有机层。通过离心分离各层后,可利用异丙醇沉淀RNA,并用75%乙醇洗涤,最终获得高纯度的RNA。 优势 高效性:Trizol试剂能够快速裂解细胞,提取过程通常在1小时内完成。 高纯度:提取的RNA纯度高,A260/280比值通常在1.8-2.0之间,适用于多种下游实验。 适用范围广:适用于多种样本类型,包括细胞、组织、细菌、酵母和病毒等。 操作简便:操作步骤简单,允许同时处理多个样本。
In-Fusion Cloning Kit 是一种基于同源重组原理的无缝克隆技术,广应用于分子生物。
在分子生物学和生物技术研究中,RNA转录是一个关键步骤,尤其是在基因表达研究、RNA结构分析和体外转录应用中。T7快速高产量RNA转录试剂盒以其高效、便捷和高产量的特点,成为实验室中不可或缺的工具。 试剂盒的优势 T7快速高产量RNA转录试剂盒的核心是T7 RNA聚合酶,这是一种高效的单亚基酶,能够特异性地识别T7噬菌体启动子序列,并在短时间内合成大量的RNA。试剂盒通过优化反应条件,确保了RNA合成的高效率和高产量。与传统的转录方法相比,T7快速高产量RNA转录试剂盒能够在短时间内完成转录反应,大大提高了实验效率。 应用广泛 T7快速高产量RNA转录试剂盒在多个领域都有广泛应用。在基因表达研究中,它可以用于合成特定的mRNA,用于后续的翻译实验或基因功能研究。在RNA结构分析中,该试剂盒能够合成高质量的RNA样本,用于核磁共振(NMR)或X射线晶体学等结构生物学研究。此外,它还可以用于合成RNA探针,用于原位杂交或基因芯片分析,帮助科学家快速定位和检测目标基因。
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