在含有抑制剂的样本中SYBR Green qPCR Mix 仍能保持较高的扩增效率适用于复杂样本检测
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由2M Tris-acetate和50 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释50倍后的1×TAE工作液含有40 mM Tris-acetate和1 mM EDTA,pH值约为8.0。高效分离:特别适合分离大于13 kb的DNA片段,能够提供更好的分离效果。适用范围广:适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳,尤其在回收DNA片段时表现优异。使用方法稀释:将50×TAE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释50倍,制备1×工作液。电泳:将稀释后的1×TAE缓冲液加入电泳槽中,确保完全覆盖凝胶。根据实验需求调整电泳电压和时间。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察核酸条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,有效期为1年。分装建议:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。
DL200DNAMarker是一种即用型的分子量标准由重组质粒经酶切获,包含多个特定长度的双链DNA
GTBE电泳缓冲液(10×)是一种专为DNA电泳设计的高浓度缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它由甘氨酸和TBE(Tris-Borate-EDTA)组成,特别适用于脉冲场凝胶电泳(PFGE)。产品特性成分:主要由甘氨酸、TBE缓冲液(Tris-Borate-EDTA)和防腐剂组成。缓冲能力:缓冲能力较弱,特别适合分离小于2000 bp的DNA片段。 即用型设计:10×浓缩液,使用时需用去离子水稀释10倍至1×后使用。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释缓冲液:将10×GTBE缓冲液用去离子水稀释10倍,制备1×工作液。制备凝胶:使用1×GTBE缓冲液制备琼脂糖凝胶。电泳操作:将样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的DNA染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察DNA条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,开封后尽快使用,有效期为12个月。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。
该试剂盒采用一步法RT-qPCR技术,将逆转录和定量PCR反应集成在同一管中完成。
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。
对于小于500 bp的DNA片段,检测信号可能较弱,建议使用其他染料如SYBR Green I。
在分子生物学实验中,6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是一种常用的试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,帮助核酸样品沉入凝胶加样孔并提供电泳迁移的示踪功能。 组成成分及作用6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 的主要成分包括:二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚蓝(Bromophenol Blue):这两种染料在电泳过程中作为示踪剂,帮助观察电泳的进程。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔中。Tris-HCl 和 EDTA:Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境,而 EDTA 可以螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法混合比例:通常将 1 μL 的 6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 与 5 μL 的核酸样品混合。电泳操作:混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中,通过观察染料的迁移情况来判断电泳是否完成。特点与优势双色示踪:二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。
甘油(Glycerol):含量为60%,用于增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔。
4S Red Plus 核酸染色剂是一种高灵敏度、低毒性的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。 产品特性安全性高:4S Red Plus 是一种油性大分子,分子量约为1,000,无法穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。Ames测试结果显示,该染色剂的诱变性极低,几乎没有致癌性。灵敏度高:对核酸的迁移影响小于SYBR Green I,能够提供清晰的条带。稳定性好:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加,无需等待溶液冷却。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。操作简单:与EB的使用方法相似,无需脱色或冲洗。适用范围广:可选择凝胶染色法和泡染法;适用于琼脂糖凝胶或丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。经济实惠:单次成本比银染和SYBR Green I低。使用方法胶染法(推荐方法):制备100 mL琼脂糖溶液,加热溶解后冷却至60-70℃。加入10 µL 4S Red Plus 核酸染色剂(10,000×)。轻柔混合(注意排去气泡)后铺胶。
通过对比不同GC含量和引物Tm值的体系,该试剂盒在多种复杂条件下均能保持高特异性,生成清晰的扩增曲线
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。 使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。
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