这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR Probe Kit作为一种一体化的一步法探针法qPCR试剂盒,为研究人员提供了一个高效、便捷且高特异性的实验解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR Probe Kit采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 产品特点 高效逆转录酶:该试剂盒含有高效的逆转录酶,能够在短时间内将RNA转录为cDNA,确保逆转录反应的高效进行。 优化的反应体系:试剂盒中的反应体系经过优化,包含热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、探针法qPCR所需的荧光染料以及其他必要的成分。
SYBR Green qPCR Mix是一种高性能的qPCR试剂,凭借其高灵敏度,为生物学研究的工具
Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯
其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL
25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液是一种用于核酸电泳的辅助试剂,能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,确保样品能够沉入凝胶加样孔。EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。应用场景25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液广泛应用于核酸的琼脂糖凝胶电泳实验中。它适用于检测 DNA 和 RNA 的片段大小、纯度以及分离效果。使用方法在使用前,需将 25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液稀释至所需浓度(如 6× 或 5×),然后与核酸样品按比例混合(通常为 1:1)。混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中进行电泳。储存条件该缓冲液应保存在室温下,避免光照和污染。25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液凭借其高效的样品沉降能力和清晰的示踪效果,已成为核酸电泳实验中不可或缺的工具,为科研人员提供了便捷和可靠的实验支持。
Taq PCR Master Mix (2×) Without Dye 是一种即用型的PCR预混液
在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心工具,而AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)凭借其快速高效的特性,成为了现代实验室中不可或缺的高效解决方案。 AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为快速、高效的DNA扩增而设计。其核心成分是一种经过优化的热启动Taq DNA聚合酶,能够在短时间内完成高效的DNA合成。这种酶结合了热启动技术,确保在PCR反应的高温变性步骤中才被激活,从而有效避免非特异性扩增,提高反应的特异性和灵敏度。 该Master Mix的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。同时,预混染料的加入使得实验人员可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液,进一步提高了实验的便捷性。 AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)的另一个显著特点是其优化的反应条件。
该产品预混了高浓度的ROX参考染料,适用于需要高浓度ROX校准的qPCR仪器,能够有效校正孔间荧光
在分子生物学实验中,DNA合成是许多技术的核心,而dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)作为一种特殊的试剂,为DNA合成提供了更多可能性。这种混合液结合了四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脱氧尿苷三磷酸(dUTP),为PCR反应和其他DNA合成实验提供了多功能的支持。 dNTP/dUTP Mixture的独特优势 dNTP/dUTP Mixture (2.5 mM each/5 mM)是一种精心设计的混合液,其中每种dNTP的浓度为2.5 mM,而dUTP的浓度为5 mM。这种独特的配方使其在多种实验中表现出色: PCR反应中的应用:在传统的PCR反应中,dNTPs是DNA合成的基本原料。然而,dUTP的加入为PCR反应提供了额外的功能。例如,某些PCR反应需要引入dUTP来标记DNA,或者在后续实验中利用尿嘧啶糖基化酶(UNG)去除dU,从而实现PCR产物的特异性降解。这种混合液能够满足这些特殊需求,同时保持反应的高效性和特异性。
二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。
T4 UvsY蛋白是一种来源于T4噬菌体的重组调节蛋白,分子量约为16 kDa。它在T4噬菌体的同源重组过程中发挥关键作用,通过促进T4 UvsX重组酶与单链DNA(ssDNA)的结合,增强同源重组的效率。功能与作用机制重组调节:UvsY蛋白通过与UvsX重组酶形成复合物,促进UvsX与ssDNA的结合,从而加速链置换反应。 单链DNA结合:UvsY蛋白本身具有单链DNA结合活性,能够稳定ssDNA并促进其与UvsX的结合。释放单链结合蛋白:UvsY蛋白能够从ssDNA-单链结合蛋白复合物中释放单链结合蛋白(如T4 gp32),为UvsX重组酶提供结合位点。应用场景 T4 UvsY蛋白是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心组分之一,广泛应用于等温核酸扩增。它能够显著提高RPA反应的效率和特异性,适用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。
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