该试剂盒采用一步法RT-qPCR技术,将逆转录和定量PCR反应集成在同一管中完成。
在现代分子生物学实验中,PCR技术是不可或缺的工具,而Pfu Master Mix (2×) (Without Dye)以其卓越的高保真性和便捷性,成为了众多科研人员的首选试剂。 Pfu Master Mix (2×)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专门用于高保真DNA扩增。它以Pfu DNA聚合酶为核心,这种酶源自嗜热菌Pyrococcus furiosus,具有强大的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中及时纠正错误配对的碱基。这种校正功能使得Pfu酶的保真度远高于传统的Taq酶,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 Pfu Master Mix (2×) (Without Dye)的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系,大大简化了操作步骤。这种预混液不仅节省了时间,还减少了人为误差,确保了反应的均一性和稳定性。同时,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。实验人员可以根据需要选择是否添加染料,或者直接用于下游应用,如克隆、测序或无染料的凝胶电泳分析。
优化了反应缓冲体系,能够在短时间内完成高效扩增。其快速热启动Taq酶的扩增效率比普通Taq酶更高
在生物实验中,核酸染色是检测DNA和RNA的重要步骤,但传统染料如溴化乙锭(EB)具有致癌性,对实验人员和环境存在潜在危害。4S Green Plus 无毒核酸染料作为一种新型的EB替代品,为科研人员提供了一种安全、高效且环保的选择。 4S Green Plus 是一种无毒、非致癌的核酸染料,其灵敏度与EB相当,能够检测到低浓度的核酸分子。它在295 nm和490 nm处具有荧光激发最大值,与结合DNA的EB荧光激发点相近,可在紫外灯或蓝光LED下清晰观察DNA条带。这种染料不仅安全性高,还具有高特异性和荧光稳定性,不会与其他细胞成分结合,且在实验过程中荧光信号稳定。 4S Green Plus 的使用方法灵活,既可用于凝胶前染色,也可用于凝胶后染色。在凝胶前染色时,将染料加入冷却至50-60℃的琼脂糖溶液中;在凝胶后染色时,每100 mL染色溶液中加入20-30 μL染料,染色30分钟后脱色即可。此外,4S Green Plus 适合用于琼脂糖凝胶中的双链DNA、单链DNA和RNA的检测。
DL2000 Plus在正常使用条件下,可在室温下稳定存放,不会出现条带降解或弥散现象
核酸内切酶VIII(Endonuclease VIII,Endo VIII)是一种具有N-糖基化酶和AP-裂解酶活性的DNA损伤修复酶,广泛应用于基因损伤修复研究。其截短体则是通过基因工程改造,删除部分氨基酸序列而获得的变体,通常用于特定的研究目的,如提高酶的稳定性或特异性。 功能与特性 N-糖基化酶活性:识别并切除双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生脱嘌呤(AP)位点。 AP-裂解酶活性:在AP位点的3'和5'端切割磷酸二酯键,产生具有3'和5'磷酸的碱基缺口。 高纯度与稳定性:核酸内切酶VIII截短体通过重组表达获得,纯度高,无核酸外切酶、核酸内切酶和RNase残留。 热失活:75℃孵育10分钟可使酶失活。 应用场景 DNA损伤修复研究:用于模拟和修复DNA损伤,特别是在氧化损伤研究中。 单细胞凝胶电泳(彗星试验):评估细胞内和体外的氧化DNA损伤。 NGS建库:在二代测序中,特异性切除含AP位点的模板链,实现双端测序。 酶法合成DNA:释放DNA链,用于合成特定的DNA结构。
λ DNA HindIII + EcoRI是一种常用的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中。
4S GelBlue 核酸染料是一种高灵敏度、低毒性、稳定的荧光核酸染色试剂,广泛应用于核酸凝胶电泳实验中。它能够有效替代传统的溴化乙锭(EB)染料,提供更安全、更环保的染色方案。产品特点高灵敏度:4S GelBlue 能够检测低至 20 pg 的核酸条带,灵敏度高于传统染料。低毒性:该染料无法穿透细胞膜,具有极低的细胞毒性和诱变性,使用更加安全。稳定性高:在广泛的 pH 范围(3.0-10.0)和温度条件下保持稳定,适用于多种电泳缓冲系统。信噪比高:荧光信号强,背景信号低,能够提供清晰的电泳条带。操作简便:无需脱色或冲洗,可以直接使用紫外凝胶透射仪或蓝光切胶仪观察。使用方法4S GelBlue 提供两种染色方法:胶染法:在制备琼脂糖凝胶时,将 10000× 的 4S GelBlue 染料稀释至 1× 工作浓度(例如,每 50 mL 琼脂糖溶液中加入 5 μL 染料),混匀后倒入制胶器中。泡染法:电泳完成后,将凝胶浸入 3× 染色液中,室温振荡染色 10-60 分钟,无需脱色。
RcView 吖啶橙核酸染料不仅适用于DNA和RNA的凝胶电泳分析,还可用于细胞染色实验。
溴化乙锭溶液(EB, 10 mg/ml, RNase free)是一种高度灵敏的荧光染色剂,广泛用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA和RNA分子。它经过RNase-free处理,适用于RNA样本的电泳。产品特性成分:10 mg/ml溴化乙锭和去离子水。保存条件:室温避光保存,有效期为2年。用途:用于核酸电泳前后的染色,以及流式细胞仪的样品染色处理。荧光特性:在302 nm紫外光激发下,放射出橙红色信号。检测灵敏度:可检测到少至10 ng的DNA条带。使用方法电泳前染色(胶染法):将100 ml的琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)放入微波炉中融化。冷却至60℃左右后加入5-10 µl的溴化乙锭溶液(10 mg/ml),轻轻摇匀后倒胶,避免产生气泡。待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察拍照。电泳后染色(泡染法):琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有EB(0.5 µg/ml)的电泳缓冲液或去离子水中。室温下染色15-45分钟(取决于凝胶厚度)。可选脱色处理:用去离子水或1 mM MgSO4溶液室温浸泡10-30分钟,以降低背景荧光。
Fast Pfu酶的扩增速度是普通Pfu酶的数倍,72℃下30秒即可延伸1kb以上大大缩短了反应时间
T5核酸外切酶(T5 Exonuclease)是一种沿5'→3'方向降解DNA的核酸外切酶,能够从DNA的5'末端或线性/环状双链DNA的缺口(gap)或切刻(nick)处起始消化。它对超螺旋双链DNA无作用,并且具有单链DNA核酸内切酶活性。 特性与应用 高效降解:T5核酸外切酶能够高效降解线性单链和双链DNA,以及切刻的质粒DNA。 无缝克隆:在无缝克隆技术中,T5核酸外切酶用于从DNA片段的5'端切割一条链,产生3'突出末端,促进互补片段的退火配对,进而通过DNA聚合酶填补缺口,最后由DNA连接酶修复缺刻,形成完整的环状质粒。 Gibson组装:T5核酸外切酶在Gibson组装中发挥关键作用,通过从DNA片段的5'末端开始消化,产生互补的单链3'末端,促进片段退火和连接。 去除污染:该酶可用于去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性DNA,提高DNA克隆效率。 使用方法 储存条件:T5核酸外切酶通常保存于-20℃,有效期可达3年。 反应条件:在37℃下反应30分钟,加入至少11 mM EDTA或含有SDS的DNA Loading Buffer终止反应。
上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!