One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)还具备高灵敏度和高特异性的
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是一种关键的基因表达分析技术。其中,基于探针(Probe)的qPCR方法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于各种实验场景。Probe qPCR Mix (2×)作为一种专为探针法qPCR设计的预混液,为研究人员提供了一个高效、便捷且可靠的实验解决方案。 Probe qPCR Mix (2×)的核心优势 Probe qPCR Mix (2×)是一种高浓度的预混液,专为探针法qPCR实验设计。它含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及其他必要的成分。这种预混液的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和荧光探针加入其中,即可快速配制好反应体系,大大简化了操作流程。 高特异性和高灵敏度 探针法qPCR的核心在于使用特异性荧光探针来检测目标DNA序列。这种探针通常设计为与目标序列完全互补,并在PCR扩增过程中与目标DNA结合。当探针与目标DNA结合时,荧光信号会显著增强,从而实现对目标基因的高特异性检测。
dUTP常用于PCR、qPCR、RT-PCR等反应中替代dTTP,可有效去除污染产物,避免假阳性
Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯
缓冲液中的 Tris-HCl 和 EDTA 组分能够维持电泳过程中的稳定环境。
在生物实验中,核酸染色是检测DNA和RNA的重要步骤,但传统染料如溴化乙锭(EB)具有致癌性,对实验人员和环境存在潜在危害。4S Green Plus 无毒核酸染料作为一种新型的EB替代品,为科研人员提供了一种安全、高效且环保的选择。 4S Green Plus 是一种无毒、非致癌的核酸染料,其灵敏度与EB相当,能够检测到低浓度的核酸分子。它在295 nm和490 nm处具有荧光激发最大值,与结合DNA的EB荧光激发点相近,可在紫外灯或蓝光LED下清晰观察DNA条带。这种染料不仅安全性高,还具有高特异性和荧光稳定性,不会与其他细胞成分结合,且在实验过程中荧光信号稳定。 4S Green Plus 的使用方法灵活,既可用于凝胶前染色,也可用于凝胶后染色。在凝胶前染色时,将染料加入冷却至50-60℃的琼脂糖溶液中;在凝胶后染色时,每100 mL染色溶液中加入20-30 μL染料,染色30分钟后脱色即可。此外,4S Green Plus 适合用于琼脂糖凝胶中的双链DNA、单链DNA和RNA的检测。
DNAMarkerVI是一种广泛应用于生物医学研究和分子生物学实验中的DNA分子量标准双链DNA条带
在分子生物学实验中,6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是一种常用的试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,帮助核酸样品沉入凝胶加样孔并提供电泳迁移的示踪功能。 组成成分及作用6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 的主要成分包括:二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚蓝(Bromophenol Blue):这两种染料在电泳过程中作为示踪剂,帮助观察电泳的进程。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔中。Tris-HCl 和 EDTA:Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境,而 EDTA 可以螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法混合比例:通常将 1 μL 的 6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 与 5 μL 的核酸样品混合。电泳操作:混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中,通过观察染料的迁移情况来判断电泳是否完成。特点与优势双色示踪:二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。
它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。
3×甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专门用于核酸电泳的辅助试剂,特别适用于RNA样品的变性电泳。它能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分该缓冲液的主要成分包括: 90% 甲酰胺(Formamide):用于变性核酸,使其保持单链状态。0.075% 二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 0.075% 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。30 mM EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。变性处理:将混合后的样品在 70℃加热变性 5-15 分钟,然后立即置于冰上冷却,以防止核酸复性。电泳上样:将处理后的样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景3×甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于RNA样品的变性电泳,适用于甲醛变性或非变性的琼脂糖凝胶电泳以及聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可用于寡聚单链DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。储存条件该缓冲液应冷藏保存(2-8℃),以确保其稳定性和有
Pfu DNA聚合酶具有3′-5′外切酶活性,能够在扩增过程中纠正碱基错配,是Taq酶的10-50倍
在分子生物学和生物医学研究中,逆转录定量PCR(RT-qPCR)是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit作为一种一体化的试剂盒,为研究人员提供了一种高效、便捷的一步法RT-qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 产品特点 高效逆转录酶:该试剂盒含有高效的逆转录酶,能够在短时间内将RNA转录为cDNA,确保逆转录反应的高效进行。 优化的反应体系:试剂盒中的反应体系经过优化,包含SYBR Green荧光染料、热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺等所有必需成分,确保了qPCR反应的高效扩增。
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