Probe qPCR Mix 可用于定量分析基因表达水平,帮助研究人员研究基因在不同生理条件下的变化
T4 RNA连接酶2截短型(突变型)是一种经过基因工程改造的酶,通过引入特定的氨基酸突变(如R55K和K227Q),在保持高效连接活性的同时,显著降低了RNA的非特异性连接问题。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'羟基末端,无需ATP参与反应。 特点 高效连接活性:能够高效连接预腺苷化的单链DNA或RNA。 低背景连接:突变型酶减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。 无核酸酶污染:经过严格测试,确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。 热稳定性高:某些突变体在较高温度(如45℃和50℃)下仍保持较高的连接活性。 应用 T4 RNA连接酶2截短型(突变型)广泛应用于以下领域: 小RNA文库构建:用于二代测序(NGS)中的miRNA文库构建。 cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上。 链特异性cDNA文库构建:用于合成链特异性的cDNA文库。 使用方法 反应条件:在1×反应缓冲液中,25℃温育。 灭活条件:65℃加热20分钟。
dNTP Mix是一种由 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP 组成的等摩尔混合溶液
phi29 DNA Polymerase 是一种源自 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,具有极高的过程性(processivity)和链置换活性,能够在等温条件下高效扩增DNA。这种酶还具有3'→5'外切酶(校对)活性,能够确保DNA合成的高保真性。特性与优势 高过程性:phi29 DNA Polymerase 可以合成超过70 kb的长DNA片段,无需辅助蛋白。链置换活性:强大的链置换能力使其能够在等温条件下高效扩增DNA。高保真性:3'→5'外切酶活性能够实时校正错误,确保DNA复制的高准确性。等温扩增:无需复杂的温度循环,适合快速、高效的DNA扩增。应用场景phi29 DNA Polymerase 广泛应用于多种分子生物学实验:滚环扩增(RCA):用于生成周期性DNA纳米模板,适合检测低丰度核酸。多重置换扩增(MDA):一种等温扩增技术,能够在恒定温度下进行全基因组扩增。全基因组扩增(WGA):用于从微量DNA样本中扩增全基因组,适用于单细胞测序。DNA模板制备:可用于测序的高质量DNA模板制备。
Phusion DNA聚合酶具有3'→5'外切酶活性,能够有效校正错误,生成平末端产物
T4 UvsX重组酶是一种来源于T4噬菌体的重组酶,属于RecA/Rad51家族的同源体。它在双链DNA断裂的修复和复制叉重新启动的过程中起重要作用。T4 UvsX重组酶能够与单链DNA结合并形成核酸蛋白复合物,该复合物通过寻找与双链DNA的互补区域进行杂交,从而完成链置换反应。功能与特性链置换能力:T4 UvsX重组酶能够与单链DNA结合,形成稳定的核酸蛋白复合物,并在双链DNA中寻找同源序列,完成链置换反应。无核酸酶活性:该酶本身不具有核酸酶活性,不会降解DNA。等温扩增:T4 UvsX重组酶是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心酶,能够在37-42℃的等温条件下高效扩增DNA。应用场景等温扩增(RPA):T4 UvsX重组酶是RPA技术的关键组分,能够在等温条件下快速、灵敏地扩增DNA。病原体检测:RPA技术可用于检测多种DNA和RNA病原体,如MERS、HIV-1、埃博拉病毒和COVID-19,检测下限通常低于100个拷贝。即时诊断(POCT):RPA技术因其快速、简便的特点,非常适合现场快速诊断试剂的开发。
SYBR Green I是qPCR中常用的荧光染料,能够实时监测DNA扩增过程,广泛用于基因表达分析
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由2M Tris-acetate和50 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释50倍后的1×TAE工作液含有40 mM Tris-acetate和1 mM EDTA,pH值约为8.0。高效分离:特别适合分离大于13 kb的DNA片段,能够提供更好的分离效果。适用范围广:适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳,尤其在回收DNA片段时表现优异。使用方法稀释:将50×TAE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释50倍,制备1×工作液。电泳:将稀释后的1×TAE缓冲液加入电泳槽中,确保完全覆盖凝胶。根据实验需求调整电泳电压和时间。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察核酸条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,有效期为1年。分装建议:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。
DNAMarkerIplus在4℃条件下可稳定保存3个月-20℃下可长期保存这种稳定性确保可靠性
T4 UvsY蛋白是一种来源于T4噬菌体的重组调节蛋白,分子量约为16 kDa。它在T4噬菌体的同源重组过程中发挥关键作用,通过促进T4 UvsX重组酶与单链DNA(ssDNA)的结合,增强同源重组的效率。功能与作用机制重组调节:UvsY蛋白通过与UvsX重组酶形成复合物,促进UvsX与ssDNA的结合,从而加速链置换反应。 单链DNA结合:UvsY蛋白本身具有单链DNA结合活性,能够稳定ssDNA并促进其与UvsX的结合。释放单链结合蛋白:UvsY蛋白能够从ssDNA-单链结合蛋白复合物中释放单链结合蛋白(如T4 gp32),为UvsX重组酶提供结合位点。应用场景 T4 UvsY蛋白是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心组分之一,广泛应用于等温核酸扩增。它能够显著提高RPA反应的效率和特异性,适用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。
T4 DNA连接酶是一种在分子生物学中不可或缺的工具酶,广泛应用于基因工程和DNA操作中。
在分子生物学实验中,6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是一种常用的试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,帮助核酸样品沉入凝胶加样孔并提供电泳迁移的示踪功能。 组成成分及作用6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 的主要成分包括:二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚蓝(Bromophenol Blue):这两种染料在电泳过程中作为示踪剂,帮助观察电泳的进程。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔中。Tris-HCl 和 EDTA:Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境,而 EDTA 可以螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法混合比例:通常将 1 μL 的 6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 与 5 μL 的核酸样品混合。电泳操作:混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中,通过观察染料的迁移情况来判断电泳是否完成。特点与优势双色示踪:二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。
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